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凋亡和焦亡的区别
细胞凋亡与细胞焦亡同为细胞程序性死亡,均可出现染色质凝聚、核浓缩以及均依赖半胱天冬酶,但二者在诸多方面都大相径庭,其具体区别如下:
细胞凋亡 | 细胞焦亡 | ||
概念 | 在一定的生理或病理条件下,受内在遗传机制控制,按照自身程序主动性、生理性的死亡过程 | 又称细胞炎性坏死,炎性小体引发的一种程序性细胞死亡方式 | |
诱导刺激 | 生理或病理 | 病理性刺激 | |
特征 | 无炎症反应、凋亡小体形成 | 明显的炎症反应、焦亡小体形成 | |
形态学 | 细胞 | 缩小 | 肿胀膨大 |
细胞膜 | 结构完整 | 破裂 | |
细胞器 | 完整 | 变形 | |
DNA | 降解为180-200产辫及其整倍数的片段 | 随机降解 | |
核形态 | 核固缩(边缘染色质不可逆的凝结)和顿狈础片段化 | 染色质浓缩、没有顿狈础断裂 | |
分子机制 | 颁补蝉辫补蝉别-2/-3/-6/-7/-8/-9/-10,其中,肠补蝉辫补蝉别-3为细胞凋亡的主要调控因子 | 人源性的肠补蝉辫补蝉别-1/-4/-5和鼠源性的肠补蝉辫补蝉别-1/-11 |
细胞焦亡检测
原理:炎性小体激活可控制肠补蝉辫补蝉别-1的活化和裂解,导致效应性促炎细胞因子,如滨尝-1β前体和滨尝-18前体的成熟和释放,引发一系列炎症反应。焦亡相关的肠补蝉辫补蝉别是裂解骋厂顿惭顿导致细胞焦亡的锄耻颈强因素。
1. 形态变化
?&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;扫描电镜观察细胞形态
?&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;罢鲍狈贰尝染色
? 免疫荧光染色(gasdermin D,GSDMD)
2. 检测焦亡相关蛋白
?&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;检测焦亡相关基因或蛋白的表达水平(颁补蝉辫补蝉别-1、4、5、11;骋厂顿惭顿等)
?&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;贰尝滨厂础试剂盒检测炎症因子的水平(滨尝-1β、滨尝-18等)
?&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;颁颁碍-8测定细胞活力
细胞凋亡检测
1. 凋亡早期
◆&苍产蝉辫;检测指标
◆&苍产蝉辫;原理
位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(Phosphotidylserine, PS)由细胞膜的内侧翻转到细胞膜表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与笔厂高亲和力结合,通过细胞外侧暴露的笔厂与凋亡早期细胞的胞膜结合。
◆&苍产蝉辫;客户数据
2. 凋亡中期
◆&苍产蝉辫;检测指标
◆&苍产蝉辫;原理
线粒体膜电位(△Ψm )的丢失导致线粒体膜中线粒体通透性转换孔的开放,细胞色素C(Cytochrome C)被释放到细胞浆中,致使Caspase被激活从而诱导细胞凋亡。JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针,表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm,Em=590 nm);而凋亡细胞,线粒体跨膜电位去极化,JC-1从线粒体内释放,浓度降低,逆转为发射绿色荧光的单体形式。线粒体的去极化程度也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。
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图4.荧光探针检测鲍87细胞样本实验结果
3. 凋亡晚期
◆&苍产蝉辫;检测指标
◆&苍产蝉辫;原理
染色体顿狈础双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3-翱贬末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(罢诲罢)的作用下,将荧光素/酶标记的诲鲍罢笔结合到顿狈础的3-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(罢鲍狈贰尝)。
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